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近些年冬天冷夏天熱,空調(diào)的使用率大大增加,但要當心空調(diào)冷卻水中的隱形殺手----軍團菌。由軍團菌引起的軍團菌病是非典型肺炎的重要組成部分,是一種暴發(fā)流行或散發(fā)流行的嚴重呼吸道傳染病,世人第一次認識軍團病是在1976年7月,那時美國費城召開了第56屆美國退伍軍人年會,與會者中有182人發(fā)生肺炎,事后在病人肺組織中接種分離出一種致病菌,這種病菌來自旅館的空調(diào)系統(tǒng),以后醫(yī)學界將這種病菌命名為嗜肺軍團菌,把因這種病菌引起的疾病稱為軍團病。軍團菌是一種水中的細菌,不僅存在于自然界水中,也存在于污染的水塔水、熱水、礦泉水中。隨著我國人民生活水平的提高,尤其是大型建筑物,如賓館、醫(yī)院公共設施等中央空調(diào)系統(tǒng)的使用日益普遍,軍團病爆發(fā)流行的危險性也日益增加,因此了解和掌握空調(diào)冷卻水中軍團菌的檢測方法,在預防和控制軍團病的發(fā)生與流行中有十分重要的作用?,F(xiàn)將其實驗室檢測方法作簡單介紹。本文由永安昌盛中央空調(diào)維修網(wǎng)的小編轉載于互聯(lián)網(wǎng)。
一、 細菌培養(yǎng)和鑒定
1.樣品處理:水樣中的菌經(jīng)過濾膜或離心濃縮,為減少雜菌生長,濃縮樣品的一部分經(jīng)酸處理與熱處理,一部分不做處理,將上述處理與未處理樣品分別接種GVPC瓊脂平板,在5% CO2,35~36℃環(huán)境下培養(yǎng)7一lOd。
2.初步鑒定:軍團菌的菌落顏色多樣,通常呈白色、灰色、藍色或紫色,也能顯深褐 色、灰綠色、深紅色。軍團菌在GVPC選擇性平板上可形成直徑1~2 mm、灰白色、圓形、表面光滑、邊緣清楚整齊的菌落,在紫外燈下,有熒光,為革蘭氏陰性桿菌。在選擇性平板上挑選可疑菌落,接種于BCYE瓊脂平板和 BCYE-Cys平板進行傳代培養(yǎng),36±1℃培養(yǎng)至少 2d,凡在前者上生長而在后者上不生長的即為軍團菌。
3.生化鑒定:常用的生化實驗有糖發(fā)酵試驗、淀粉水解試驗、觸酶試驗、明膠液化試驗、內(nèi)酰胺酶試驗、硝酸鹽還原試驗、尿素酶試驗、馬尿酸鹽水解試驗等。
二、分型鑒定:采用軍團菌乳膠凝集試劑盒進行分型診斷,我國常見的型別有Lp1、Lp3、Lp5、Lp6、Lp9等。
三、PCR 法檢測菌株特異系性基因:主要檢測基因種類為軍團菌屬特異基因5sRNA、16sRNA和嗜肺軍團菌種特異基因Mip基因。
四、其他檢測方法:常用的方法有放射免疫法(R1A)、酶免疫法(EIA)、直接熒光抗體法(DFA)、免疫層析法(ICA)等多種方法;此外,核酸探針技術是近幾年發(fā)展起來的一種快速診斷軍團菌病原體的方法,根據(jù)軍團菌的核酸序列合成一段寡核苷酸,用同位素標記,并與被檢測核酸分子雜交,通過檢測放射性信號,確定軍團菌感染。這種方法具有特異性高,快速等優(yōu)點。
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